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玉米原位杂交技术服务-科锐诺

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2025-2-28  
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王经理18627856353 18627856353
联系地址
湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼
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原位杂交天

1. 重新水化和固定

1 吸取固定好的胚胎,加入50%的pbst溶液,放置5分钟。

2 置换成30%的pbst溶液,放置5分钟

3 置换成pbst溶液,放置5分钟,重复一次

4 置换成4%---的pbs溶液固定20分钟5 用pbst洗两次,每次放置五分钟,室温。

蛋白酶处理与后固定本实验不做此步

1 用10ul/ml的蛋白酶k在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织,以便于杂交。

2 用pbst溶液轻洗,在pbst中放置5分钟。

3 用4%---的pbs溶液固定20分钟,室温。

4 用pbst洗两次,每次放置五分钟,室温。

2. 预杂交

1每个管中置换成大约300ulhyb-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。

2用等体积的hyb+取代hyb-。

360℃水浴,预杂交4小时以上。

3. 杂交

1吸去预杂交的hyb+,加上100ul已加入探针的hyb+溶液探针浓度约为1ng/ul..

260℃ 温浴过夜。注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。





tunel流式细胞凋亡检测服务通常称为细胞程序性死1亡,是由基因控制的主动性细胞死1亡过程。越来越多数据发现,细胞凋亡与多种---密切相关,如癌细胞具有连续增殖、抵抗细胞凋亡能力,玉米原位杂交技术服务,利用流式细胞仪分析细胞凋亡可为肿1瘤诊断,疗1效评价和预后预测提供了重要的参考指标。

  tuneltdt-mediated dutp nick end labeling细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核dna的断裂情况,其原理是生物素biotinylate标记的dutp在脱氧核糖核苷酸末端转移酶tdt enzyme的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂dna的3-oh末端,并与连接辣根---化酶hrp,horse-radish peroxidase的链霉亲和素streptavidin特---结合,后者又与pod底物h2o2、二氨1基联1---1胺dab产生深棕色反应,特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在光学显微镜下即---察凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有dna断裂,因而没有3-oh形成,很少能够被染色。本试剂盒适用于组织样本石蜡包埋、冰冻和超薄切片和细胞样本细胞涂片在单细胞水平上的凋亡原位检测。还可应用于抗肿1瘤药的药1效评价,以及通过双色法确定细胞类型和分化阶段。



分子病理学诊断主要应用于以下几个方面:1、对于肿l瘤---的检测,对于肿l瘤高危人群的筛检具有实用价值,如检测gstπ基因以判定个体暴露于---物是的---危险性。2、肿l瘤相关---的检测,如采用原位杂交方法检测标本中hpv、eber等---。3、疑难肿l瘤的诊断和分类,尤其在鉴别诊断淋巴细胞增l生性---与淋巴细胞性肿l瘤上有着---的特---和---性。4、肿l瘤的个体化治l疗,能够根据肿l瘤发生l发展不同阶段分子水平的特点,对肿l瘤的个体化和预见性治l疗具有指导意义。5、肿l瘤的预后判断,如采用荧光原位杂交技术fish检测her-2基因在乳l腺l癌---中的表达情况,配合术后治l疗,指导---用药选择。



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